Master Degree / Yüksek Lisans Tezleri

Permanent URI for this collectionhttps://hdl.handle.net/11147/3008

Browse

Filters

2013 - 201912020 - 20251

Settings

Subject: search.filters.subject.RNA

Search Results

Now showing 1 - 2 of 2
  • Master Thesis
    Uzun Kodlanmayan RNA Antiviral Yanıtı Negatif Düzenleyici (NRAV)'nin Braf-mutant Melanomada İnterferon ile Uyarılan Genlerin İfadelerinin Düzenlenmesindeki Rolü
    (2025) Durmuş, Kadir Ziya; Ekiz, Hüseyin Atakan
    Bu tez çalışması, uzun kodlamayan RNA'lardan (lncRNA) biri olan NRAV (Negative Regulator of Antiviral Response)'in BRAF mutasyonu taşıyan melanom hücrelerinde interferon (IFN) uyarılı gen ekspresyonu üzerindeki etkilerini incelemek-tedir. NRAV daha önce viral enfeksiyon modellerinde interferon yanıtını baskıladığı gösterilmiş bir molekül olmasına rağmen, tümör immünolojisindeki rolü net olarak ortaya konmamıştır. Bu çalışma, NRAV'ın melanom bağlamında bağışıklık sistemine karşı nasıl işlev gördüğünü deneysel olarak değerlendiren ilk çalışmalardan biridir. TCGA-SKCM veri seti üzerinde yapılan biyoinformatik analizlerde, yüksek NRAV ekspresyonunun IFN-α, IFN-γ ve inflamasyon yollarını baskıladığı; bununla birlikte düşük hasta sağkalımıyla ilişkili olduğu gösterilmiştir. A375 melanom hücre hattında oluşturulan NRAV aşırı ekspresyon ve susturma modellerinde yapılan IFN-α ve IFN-γ uygulamaları sonrası, interferon uyarılı genlerin ekspresyon düzeylerinde belirgin farklılıklar gözlenmiştir. NRAV susturulduğunda bu genlerin ekspresyonu artarken, aşırı ekspresyon durumunda baskılanmıştır. Ancak hücre canlılığı ve prolife-rasyon deneylerinde NRAV'in fazla etki yaratmadığı görülmüştür. Hatta literatürün aksine NRAV baskılanmasının kısmi olarak melanom hücre proliferasyonunu arttırdı-ğı görülmüştür. Bu durum NRAV'in hücre canlılığı ve proliferasyona etkisinin tümör tipine özgü olabileceğini ve belki de immünojenik hücre ölümüyle ilişkili olabileceği-ni düşündürmektedir. Epigenetik analizler, NRAV'ın özellikle H3K27me3 düzeylerini artırarak kromatin bazlı baskılama mekanizmalarıyla işlev görebileceğinin ortaya koymuştur. Ayrıca LC-MS/MS analizleri, NRAV'ın YTHDF2 gibi m6A okuyucu pro-teinlerle fiziksel olarak etkileşime girebileceğini göstermiştir. NRAV, interferon yanı-tını hem epigenetik hem de post-transkripsiyonel düzeyde baskılayan bir lncRNA ola-rak melanomda immün kaçışı destekleyici potansiyele sahiptir. Bu nedenle terapötik hedef ve biyobelirteç adayıdır.
  • Master Thesis
    Investigation of Alkaline and Thermal Stability of Alpha-L Produced by Directed Evolution
    (Izmir Institute of Technology, 2013) Sürmeli, Yusuf; Şanlı Mohamed, Gülşah
    Alpha-L-arabinofuranosidase (Abf) is a type of glycoside hydrolase that cleaves the α-L-arabinofuranosidic bonds in the polysaccharides with arabinose. There are many ranges of biotechnological application fields of this enzyme such as pulp and paper industry. The purpose of this study is to identify Geobacillus vulcani GS90 by 16S rRNA analysis and to investigate the alkaline and thermal stability of Abf and its mutants produced by error-prone PCR. During this study, firstly, partial 16S rDNA gene was amplified by using universal primers, cloned and sequenced by Sanger method. The partial 16S rDNA sequence was analyzed by BLAST and phylogenetic tree was constructed. Secondly, abf and its mutants were cloned and 73 mutants were screened for functional analysis in terms of total proteins. After purification of Abf and its functional mutant enzymes, they were analyzed in terms of stability and activity against three different conditions. They were 70oC- pH 5.0, 71oC- pH 5.0 and 70oC- pH 9.6. It was detected that G. vulcani 3S-1 was the closest strain of G. vulcani GS90. In addition, it could be deduced that L307S and Q90H/L307S mutants were more stable than Abf at 71oC- pH 5.0 and less stable at 70oC- pH 9.6. According to SWISS MODEL analysis, the surrounding residues of 90th and 307th amino acid constructed no hydrogen bonds in Abf, two hydrogen bonds in Q90H/L307S and three hydrogen bonds in L307S. Moreover, it was detected that these mutants had both a longer β-strain and more number of β-strains than Abf. Finally, the predicted solvent accessibilities of Abf, Q90H/L307S and L307S were investigated and it was deduced that relocations of R447 and some asparagines could have affected the alkaline stability of them.