TR Dizin İndeksli Yayınlar / TR Dizin Indexed Publications Collection
Permanent URI for this collectionhttps://hdl.handle.net/11147/7149
Browse
1 results
Search Results
Article Optimization of Hnox Protein Production in Escherichia Coli(Sivas Cumhuriyet Üniversitesi, 2017) Sürmeli, Nur Başak; Sürmeli, Nur Başak; 03.01. Department of Bioengineering; 03. Faculty of Engineering; 01. Izmir Institute of TechnologyHemoproteinler canlılarda steroid biyosentezinden solunuma, sinyalizasyondan ilaç metabolizmasına kadar pek çok farklı biyolojik süreçlerde önemli görevler üstlenirler. Endüstride, hemoproteinler kolesterol düşürücü pravastatin, rahim ve rahim ağzı kanserlerinin hormonal tedavisinde kullanılan progesteron, alerji ve yangı'ya karşı kullanılan kortizon gibi ilaçların üretiminde kullanılmaktadır. Bunların yanı sıra hemoproteinlerin ilaç geliştirilmesi, biyolojik iyileştirme gibi alanlarda kullanılması da planlanmaktadır. Moleküler biyoloji ve protein tasarımı tekniklerinin gelişmesi ile bu proteinlerin endüstriyel uygulama alanları da genişleyecektir. Hemoproteinlerin bu alanlarda yaygın kullanımı karşısındaki en önemli engellerden biri Hem kofaktörüne bağlı bir şekilde yüksek miktarda hemoprotein üretilememesidir. Bu çalışmada Hem kofaktörüne bağlı bir şekilde üretilen hemoprotein miktarını en yüksek seviyeye getirebilecek koşullar araştırılmıştır. Bu çalışma kapsamında bakteride hemoprotein üretimini etkileyen en önemli üç etken olan indükleyici izopropil ?-D-l-tiyogalaktopiranosid (IPTG), ve Hem öncül molekülü ?-aminolevülinik asit (ALA), ve ekspresyon sıcaklığı incelenmiştir. Bu etkenlerin termofilik hemoprotein TtHNOK üretimine etkisi araştırılmıştır. Özellikle, ALA pahalı bir molekül olduğu için hemoproteinlerin üretiminde kullanılan ALA miktarının optimizasyonu önemlidir. Bu çalışma sonucunda Escherichia coli bakterisinde Hem kofaktörüne bağlı TtHNOK proteinin üretimi için en uygun koşulların düşük sıcaklık, 0,5 mM IPTG ve 1 mM ALA olduğu gösterilmiştir. Bu çalışmada çıkan sonuçlar Hem kofaktörüne bağlı hemoprotein üretiminde ALA konsantrasyonun ve ekspresyon sıcaklığının önemli olduğunu göstermiştir